1、 称取琼脂粉18克，溶于500ml蒸馏水中。
2、 称取可溶血红蛋白粉5克，溶于500ml蒸馏水中（血红蛋白粉最好用研磨钵研磨一下，溶解更充分一些）。
3、 在无菌条件下，把促淋生长剂的溶剂和粉剂混合溶解。
4、 取5ml灭菌蒸馏水加入到混合抗生素瓶中，混匀溶解。
5、 把琼脂粉溶液和血红蛋白粉溶液置于高压消毒锅中121℃ 灭菌30分钟。取出后置室温冷却到50-60℃.
6、 在无菌条件下，把促淋生长剂和混合抗生素溶液加入到血红蛋白粉溶液中，然后把血红蛋白粉溶液倒入琼脂粉溶液中，摇动混匀，然后分装到60mm平皿中。冷却凝固后置4℃冰箱中保存。保存期为1个月。
7、 可以根据需要均取半量配制。剩余的促淋生长剂和混合抗生素溶液置于－20℃冰箱中冷冻保存。
