几种亲子鉴定方法的比较
孩子的遗传特征(标记) 是由其父母双方提供的基因组合而成的,从受精的那一瞬间就已经决定了,检验父母、小孩三者的遗传特征,看它是否符合遗传规律,从而可进行亲子鉴定。常见的亲子鉴定方法有:ABO血型检查、DNA 指纹分析、STR 技术应用。
1 用红细胞血型进行亲权排除人的ABO 血型是受三个复等位基因控制的,i 为隐性基因, IA 、IB 为显性基因。决定ABO 血型的基因型有6 种: IA IA 、IAi 、IB IB 、IBi 、IA IB 、ii ,表现型有4 种:A 型、B 型、AB 型和O 型;血型遗传符合孟德尔遗传规律,在一个家庭中,孩子的血型基因必定来自于父母。但是,子女的血型并不一定和父母的血型一样,因为父母传给子女的不是血型(表现型) ,而是控制血型的基因。那么,我们可以结合父母的血型基因和孟德尔遗传规律,即可计算出孩子的可能血型的概率。用红细胞进行亲子鉴定,只能否定,不能肯定。也就是只能做亲权排除。
2 用DNA 指纹分析亲权确认 随着分子生物学的发展,自1985 年以来,DNA 指纹分析技术在亲子鉴定中被应用。大家知道,每个人体细胞内都含有23 对染色体,每条染色体中都含有一个DNA 分子,DNA 分子中的核苷酸排列顺序包含着遗传信息,这些核苷酸排列的顺序又叫序列,在DNA 分子中存在三种类型:单拷贝序列、中等程度重复序列、高度重复序列。所谓重复序列就是一种序列在DNA 分子中重复出现几百次、几千次、几万次甚至百万次。每个重复序列在300个核苷酸长度之内,由于高度重复,序列经过超离心后以卫星带出现在主要DNA 带的附近,所以也称卫星DNA ,其中的重复序列单元则称为“小卫星DNA”。“小卫星”具有高度的可变性,但在“小卫星DNA”中有一小段序列则在所有个体中都一样,称为“核心序列”。如果把核心序列串联起来作为分子探针与不同个体的
DNA 进行分子杂交,就会出现各自特有的杂交图谱。它们与人的指纹一样具有专一性和特异性,因此称作“DNA 指纹”。高分辨率的DNA 指纹图通常由15 条～30 条带组成,看上去就像商品的条形码一样。DNA指纹区中的绝大多数区带是独立遗传的,且遵循孟德尔遗传规律,后代DNA 指纹图中的每一条带都可以在双亲之一的DNA 指纹图中找到。因此,利用DNA指纹分析可进行亲子关系鉴定。如果小孩和测试男子的DNA 模式在一个或多个DNA 探针上不吻合,那被测试男子便被100 %排除,他不可能是孩子的生父;如果孩子和被测试男子的DNA 模式完全吻合,那么我
们可计算出99. 9 %或更大的几率证实他是孩子的亲生父亲。因此,DNA 指纹分析在亲子鉴定中比ABO血型更准确,但由于DNA 指纹技术操作过程复杂、耗时费力、检材用量大,又不适合于各种场合等缺陷,再加上DNA 指纹分析法不能确定每条带的染色体定位及各位点之间的独立性,且在分型标准化方面较困难。因此,近几年亲子鉴定都是使用STR 技术。
3 STR 在亲子鉴定中的应用
短串联重复序列( short tsndem repeats 简称STR)是近年来发现的、广泛存在于人类基因组中的一类具有长度多态性的DNA 序列。它们一般由2 个～6 个碱基构成一个核心序列,核心序列在长度上呈串联重复排列,主要由核心序列拷贝数目的变化产生长度多态性。如D5S818 : 5′GGGTGATTTTCCTTTTGGT(AGAT) 7 - 14TGTGGCTATGATTGGAATCA 3′。目前实验室鉴定常使用的STR 基因座有: TH01 、VW2 FA31 、TPOX、CSFIPO、FIBRA、D3S1358、D7S820、D8S1179 和D5S818。STR 分型具有很高的灵敏度和良好的重复性,分型结果稳定可靠。因此,STR 技术较前者有更高的非父排除率和个人识别几率。STR位点的总识别率为0. 9999999999999935 ,累计非父排除为99. 999 %,在亲子鉴定中已达到很高的水平,因此被称为“第二代DNA 指纹”。STR 位点在人类基因组中广泛分布, 具有丰富的多态位点资源, 而且扩增STR基因座仅需要少量模板DNA。联合使用多个STR 位点,可满足各种需要。基于以上优点,近几年做亲子鉴定多使用STR 技术。
福建正德信司法鉴定所
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